近年来,淡水水体富营养化引起的藻类大量滋生及有关藻毒素传染已在世界领域内被宽泛报路。微囊藻毒素(microcystins,MCs)是由微囊藻属、鱼腥藻属等藻类产生的有毒代谢产品,其散布广、结构不变、毒性强,可通过饮用水、水产品和农作物等蹊径进入人体,对肝脏、肾脏、生殖系统、神经系统等拥有毒性效应,对人体健康组成严沉威胁。

MCs拥有亲水性,在水中溶化度最高可达1 g/L。同时,MCs拥有很强的耐热性,在300 ℃前提下仍能维持较长功夫不分化,加之耐酸碱,一旦自来水和食品产生MCs传染,高温烹饪和煮沸等加工过程均不易将其粉碎和去除,食品安全即无法保险。大量钻研批注,MCs可能在螺类、贝类、鱼、虾等多种水产品中堆集并沿食品链转移。
因而,急需开发用于检测食品中MCs的急剧监测工具和改善食品中降解MCs的技术,以;す医】岛腿繁J称钒踩胫柿。
检测微囊藻毒素有哪些步骤呢
目前对MCs的检测有好多步骤,如高效液相色谱(HPLC)、薄层层析法(TLC)、质谱(MS)、聚合酶链反映(PCR)法 ,酶联免疫吸附试验( ELISA)以及蛋白磷酸酶抑造试验 (protein phosphatase inhibition assay , PPIA)等。其中高效液相色谱 - 紫表检测(HPLC-UVD) 和质谱法(LC-MS)设备昂贵 ,大量的同源物却只有很幼领域可选择作为尺度。且这些步骤还必要高素质的工作人员 ,微囊藻毒素含量 ≤1mg/L 的检测极限则必要对样品进行预浓缩。而酶联免疫吸附检测技术是利用抗原抗体反映检测标本中微量物质的步骤 ,由于拥有单一、急剧、活络、低成本蹬着势 ,越来越受到宽泛的关注。

关于酶标抗体法
国度尺度《水中微囊藻毒素的测定 GB/T 20466—2006》划定了高效液相色谱法和间接竞争酶联免疫吸附法测定水中微囊藻毒素(环状七肽)的前提和具体分析步骤。《食品安全国度尺度 水产品中微囊藻毒素的测定 GB 5009.273—2016》中划定了,水产品微囊藻毒素(环状七肽)的液相色谱-串联质谱和间接竞争酶联免疫吸附的测定步骤。下面我们介绍一下酶联免疫吸附法在检测微囊藻毒素中的使用。
酶标抗体法,别名酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,简称ELISA),酶联免疫吸附法是一项把抗原抗体的免疫反映和酶的高效催化作用道理有机结合起来的一种检测技术。该技术的重要凭据有三点 : (1) 抗体吸附在固相载体表表后 ,仍拥有和抗原产生免疫反映的个性;(2)抗原和酶结合后所形成的结合物(酶标抗原),仍拥有免疫反映个性和酶的催化个性;(3)酶标抗原和抗体结合后,结合物中的酶 ,能催化底物天生有色物质,且色彩的深浅,可作为判定抗原含量的凭据。
检测MCs的ELISA重要有三种根基类型:抗原抗体复合物酶联免疫法(IC ELISA),间接竞争酶联免疫法( Indirect cELISA)和直接竞争酶联免疫法( direct cELISA)。雷腊梅等对水样、藻样及水产品中MCs的浓度进行了测定。了局批注 ,抗原抗体复合物酶联免疫法活络度最高,以单抗包被酶标板,整个测样功夫必要2.5h。直接竞争 ELISA 步骤活络度相对较低,但操作最为单一,测样功夫只需1.5h。也基于这一原因 ,所以目前在市场上可采办的MCs检测试剂盒多选取直接竞争ELISA步骤。
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